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研究技术平台
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  巴斯德所内已有的技术平台以及研究人员在分子病毒学和免疫学特定领域中的研究技术与平台是传染病预防与控制的宝贵资源,这些技术与平台可以通过合作研究进行共享。
  1. 病毒病原体生物资源
  在短暂的几年中,通过与合作医院的共同努力,研究所已经建立了一个病毒生物学资源库,涉及呼吸道感染、脑炎、肝炎和免疫缺陷疾病等。资源库还包括若干病毒基因组或病毒蛋白的分子克隆。这些病毒也可以用于抗体中和反应诊断、体外药物筛选、或者在治疗方法和疫苗前期临床研究中用来感染动物。生物安全实验室是进行病毒病原体的体外测试和小型啮齿类模型实验的重要场所,研究所建立了严格的病毒实验操作程序。
  2. 用于病毒分离与鉴定的"病毒组学"平台
  上海巴斯德所具有利用细胞培养和幼鼠从病理样本中分离病毒的技术。被感染的细胞或患病动物可以用于免疫荧光、电镜、组织学实验,也可制备超免疫血清。用超速离心机对病毒进行浓缩纯化。致病原的基因分析主要依靠多重RT-PCR,克隆的随机放大和序列分析,微阵列分析等。序列分析可利用多序列比对和系统发生分析进行研究。
  3. 蛋白质表达纯化平台
  除了病毒蛋白在细菌、酵母或杆状病毒系统内的表达外,上海巴斯德所还精于果蝇S2表达系统(vitrogen)在细胞培养(达5升)和几毫克蛋白量级的大规模表达。亲和色谱法和FPLC能够提供纯度大于95%的蛋白质,用于疫苗亚组、诊断试剂、酶分析或结晶学研究。
  4. 病毒聚合酶的生产与分析
  上海巴斯德所具有从克隆和蛋白纯化产品,到生化分析、酶学特征等多方面研究病毒聚合酶的能力。这可以用于体外条件下蛋白质或其复合物复制能力的具体突变研究、结晶学分析或者抗病毒药物的筛选。
  5. 假病毒系统
  利用慢病毒系统设计制备假病毒颗粒是上海巴斯德所开发的技术。病毒成熟时在细胞表面表达的病毒壳蛋白,通常在有基因缺陷的慢病毒释放时会装配到壳上。基因组包含有替代慢病毒壳gp140基因的一个报告基因(EGFP,荧光素酶)。由于在生物安全二级实验室可以操作假病毒,这一假病毒对中和反应测试有重要价值。我们拥有的研究技术是,利用所有H5N1型禽流感进化亚型和其他流感病毒的产物,用来在疫苗试验中做中和抗体测试,在物理、化学抗病毒因素方面做病毒抵抗力研究。这一技术也可应用于基因治疗。
  6. HCV复制子技术
  肝细胞系感染HCV的cDNA克隆产生病毒颗粒。虽然这一技术还没有成功应用于1b以外的基因型,但上海巴斯德所已经提出了为研究病毒复制和成熟提供新方法的策略,并将用于抗病毒药物测试。这一技术可以在研发项目中共享。
  7. 病毒蛋白离子通道特性的鉴定
  在非洲爪蟾卵母细胞培养和显微注射平台的基础上,在以往对冠状病毒离子通道研究的前提下,我们的研究已经扩展到其他病毒蛋白,并对抗病毒药物的筛选提供了有效工具。

2007 中国科学院上海巴斯德研究所 版权所有 
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